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1绪论1

1.1细胞工程概述2

1.1.1细胞工程概念2

1.1.2细胞工程基本内容3

1.2细胞工程发展简史7

1.2.1探索期7

1.2.2奠基期8

1.2.3蓬勃发展期8

1.3细胞工程发展前景9

1.3.1细胞工程理论发展前景9

1.3.2细胞工程技术发展前景10

1.3.3细胞工程应用前景10

1.4细胞工程学习方法10

2细胞工程理论基础12

2.1细胞全能性13

2.1.1细胞全能性定义13

2.1.2细胞全能性研究历史14

2.1.3细胞全能性应用15

2.2细胞分化与脱分化15

2.2.1细胞分化15

2.2.2细胞脱分化16

2.3细胞融合17

2.3.1细胞融合的概念17

2.3.2细胞融合的基本原理17

2.4合成生物学与人工细胞18

2.4.1合成生物学概述18

2.4.2合成生物学关键技术18

2.4.3人工细胞19

3细胞工程实验基础21

3.1细胞工程实验室的规划设计及常用仪器设备22

3.1.1基本实验室22

3.1.2辅助实验室24

3.2无菌操作技术25

3.2.1培养用品的清洗25

3.2.2灭菌原理与方法25

3.2.3无菌操作技术26

3.2.4无菌操作技术的注意事项27

3.2.5污染的检测与控制27

3.3培养基的设计与优化28

3.3.1植物细胞培养基的设计与优化28

3.3.2动物细胞培养基的设计与优化29

4细胞组织培养技术32

4.1植物细胞组织及器官培养技术33

4.1.1植物细胞和组织培养34

4.1.2植物器官培养36

4.1.3植物细胞组织开放式培养38

4.2动物细胞组织及器官培养技术38

4.2.1动物细胞培养39

4.2.2动物组织培养46

4.2.3动物器官培养48

5细胞融合技术50

5.1细胞融合技术概述51

5.1.1细胞融合方法51

5.1.2融合细胞的筛选54

5.2细胞融合技术发展历程55

5.3动物细胞融合——杂交瘤技术56

5.3.1杂交瘤技术概述56

5.3.2单克隆抗体制备基本原理57

5.3.3单克隆抗体制备基本流程58

5.3.4杂交瘤细胞的筛选65

5.3.5单克隆抗体细胞株的建立66

5.4植物细胞融合技术66

5.4.1植物原生质体制备67

5.4.2植物原生质体培养69

5.4.3植物原生质体融合71

5.4.4植物体细胞杂种植株的鉴定72

6细胞拆合与克隆技术74

6.1细胞拆合75

6.1.1细胞拆合技术发展概况75

6.1.2细胞拆合技术76

6.1.3细胞器重组78

6.1.4转染色体核移植技术79

6.2克隆技术80

6.2.1克隆的概念和分类80

6.2.2克隆技术研究进展81

6.2.3 胚胎分割技术86

6.2.4哺乳动物克隆89

7干细胞技术97

7.1干细胞概述98

7.1.1干细胞定义98

7.1.2干细胞分类99

7.2干细胞制备方法100

7.2.1胚胎干细胞制备方法100

7.2.2成体干细胞制备方法104

7.2.3诱导多能干细胞制备方法107

7.2.4肿瘤干细胞制备方法109

7.3干细胞研究进展111

7.3.1胚胎干细胞研究进展111

7.3.2成体干细胞研究进展112

7.3.3 诱导多能干细胞研究进展113

7.4干细胞临床应用114

7.4.1干细胞及其衍生产品上市情况114

7.4.2干细胞治疗的困境和对策114

8植物细胞大规模培养生产天然活性物质119

8.1植物细胞大规模培养生产天然活性物质概述121

8.1.1植物细胞大规模培养概念121

8.1.2植物细胞大规模培养生产天然活性物质特点121

8.2植物细胞大规模培养生产天然活性物质的关键技术121

8.2.1植物细胞系建立121

8.2.2高产细胞系选育122

8.2.3高产细胞系保存122

8.2.4植物细胞放大培养技术及工艺123

8.2.5产物分离纯化124

8.3植物细胞大规模培养生产天然活性物质的调控124

8.3.1植物细胞大规模培养的诱导表达调控124

8.3.2植物细胞响应外界刺激积累次生代谢物合成的信号转导途径125

8.3.3植物天然活性物质合成的分子调控机制125

8.4植物细胞大规模培养生产贵重药物应用实例126

8.4.1紫杉醇生物合成的代谢调控126

8.4.2人参皂苷生物合成和次生代谢调控129

9植物组织快速繁殖生产试管苗132

9.1植物快速繁殖的概述134

9.1.1植物快速繁殖的概念134

9.1.2植物快速繁殖的特点134

9.2植物脱毒培养技术134

9.2.1植物脱毒和快速繁殖的意义134

9.2.2植物脱毒培养的方法及原理135

9.2.3植物脱毒苗的鉴定135

9.3人工种子136

9.3.1人工种子的概念136

9.3.2人工种子各构成部分的特点136

9.3.3人工种子的储藏137

9.3.4人工种子的应用137

9.4植物组织快速繁殖生成试管苗技术138

9.4.1植物试管苗形成途径138

9.4.2试管苗的形成过程139

9.4.3试管苗形成过程存在的问题与对策141

9.4.4试管苗的应用142

9.5植物组织快速繁殖生产试管苗的应用实例143

9.5.1经济作物马铃薯的快速繁殖143

9.5.2药用植物金线莲的快速繁殖144

9.5.3景观植物香石竹的快速繁殖145

10植物细胞工程育种147

10.1植物体细胞杂交育种149

10.1.1植物体细胞杂交概述149

10.1.2植物体细胞杂交育种过程150

10.1.3植物体细胞杂交育种的应用152

10.2多倍体与单倍体育种154

10.2.1多倍体育种154

10.2.2单倍体育种155

10.3分子标记辅助育种158

10.3.1分子标记辅助育种的概念与意义159

10.3.2用于分子标记辅助育种的分子标记159

10.3.3分子标记在植物育种中的应用165

10.4体细胞突变体育种165

10.4.1体细胞突变体165

10.4.2体细胞突变体育种过程167

10.4.3体细胞无性系变异的应用168

10.4.4体细胞无性系变异育种存在的主要问题169

10.5基于细胞工程的植物转基因育种169

11动物细胞工程制药172

11.1动物细胞培养生产疫苗173

11.1.1疫苗生产用细胞基质及其特性174

11.1.2疫苗生产用新细胞系／株建立技术177

11.1.3动物细胞培养生产疫苗进展178

11.2动物细胞工程药物筛选178

11.2.1药物筛选概述178

11.2.2细胞工程药物筛选技术179

11.2.3高通量细胞筛选模型181

11.2.4高通量细胞筛选新技术182

11.3单克隆抗体的应用182

11.3.1单克隆抗体在医学检验中的应用182

11.3.2单克隆抗体在农牧业及食品安全中的应用183

11.3.3单克隆抗体药物在疾病治疗中的应用183

12胚胎移植与试管动物186

12.1受精与胚胎发育187

12.1.1受精187

12.1.2胚胎发育189

12.2胚胎移植192

12.2.1概述192

12.2.2发情控制技术192

12.2.3 胚胎移植193

12.2.4 胚胎移植的影响因素197

12.3体外受精与试管动物197

12.3.1体外受精技术在动物生产中的重要性198

12.3.2卵母细胞的体外成熟198

12.3.3精子获能200

12.3.4体外受精201

13转基因动物及其应用204

13.1转基因动物概述206

13.1.1转基因动物研究发展简史206

13.1.2转基因动物的效率207

13.1.3动物转基因的结构208

13.1.4动物转基因的表达特性209

13.1.5转基因动物的安全性209

13.2转基因动物生物反应器210

13.2.1转基因动物生物反应器的类型210

13.2.2转基因动物生物反应器制备的基本流程213

13.2.3转基因动物生物反应器存在的问题及展望213

13.3转基因动物模型214

13.3.1转基因动物制备方法215

13.3.2动物转基因载体分类218

13.3.3转基因动物的鉴定219

13.3.4人类疾病转基因动物模型221

13.3.5转基因动物的研究223

13.4转基因动物的应用225