图书介绍

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武会娟，伦永志主编著
出版社：北京：北京科学技术出版社
ISBN：9787530475324
出版时间：2015
标注页数：230页
文件大小：38MB
文件页数：243页
主题词：医学－分子生物学

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图书目录

第一章分子克隆1

第一节聚合酶链式反应（PCR）&李宝明武会娟1

一、基本原理1

二、材料、试剂与主要仪器5

三、操作步骤6

四、注意事项6

第二节琼脂糖凝胶电泳&田彦捷高丽娟7

一、基本原理7

二、材料、试剂与主要仪器10

三、操作步骤11

四、结果分析11

五、注意事项14

第三节琼脂糖凝胶中目的DNA片段的回收&田彦捷武会娟15

一、基本原理15

二、材料、试剂与主要仪器16

三、操作步骤16

四、注意事项17

第四节体外连接DNA&陈尔凝18

一、基本原理18

二、材料、试剂与主要仪器20

三、操作步骤20

四、结果分析21

五、注意事项21

第五节感受态细胞的制备&田彦捷高丽娟22

一、基本原理22

二、材料、试剂与主要仪器24

三、操作步骤24

四、注意事项25

第六节重组质粒的转化和阳性克隆的筛选&陈尔凝26

一、基本原理26

二、材料、试剂与主要仪器27

三、操作步骤28

四、结果分析28

五、注意事项28

第七节质粒DNA的提取&陈尔凝高丽娟29

一、基本原理29

二、材料、试剂与主要仪器29

三、操作步骤30

四、结果分析31

五、注意事项32

第八节 DNA限制性内切酶酶切反应&马凯34

一、基本原理34

二、材料、试剂与主要仪器37

三、操作步骤37

四、结果分析38

五、注意事项39

第九节 DNA测序&李宝明武会娟40

一、基本原理40

二、材料、试剂与主要仪器42

三、操作步骤42

四、结果分析44

五、注意事项49

第二章实时定量PCR51

第一节组织总RNA的提取&李越王琦52

一、基本原理52

二、材料、试剂与主要仪器53

三、操作步骤54

四、结果分析55

第二节实时定量荧光PCR&李越王琦57

一、基本原理58

二、材料、试剂与主要仪器63

三、操作步骤65

四、结果分析67

第三章蛋白免疫印迹70

第一节组织总蛋白的提取&程小艳武会娟70

一、基本原理70

二、材料、试剂与主要仪器76

三、操作步骤76

四、结果分析77

五、注意事项77

第二节蛋白浓度测定&程小艳武会娟77

一、基本原理77

二、材料、试剂与主要仪器81

三、操作步骤82

四、结果分析83

五、注意事项84

第三节 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）&程小艳武会娟84

一、基本原理84

二、材料、试剂与主要仪器88

三、操作步骤89

四、结果分析91

五、注意事项91

第四节转膜与封膜&程小艳武会娟92

一、基本原理92

二、材料、试剂与主要仪器97

三、操作步骤98

四、结果分析100

五、注意事项100

第五节抗体杂交&程小艳武会娟101

一、基本原理101

二、材料、试剂与主要仪器103

三、操作步骤103

四、结果分析104

五、注意事项104

第六节化学发光与显色&程小艳武会娟104

一、基本原理104

二、材料、试剂与主要仪器106

三、操作步骤107

四、结果分析107

五、注意事项108

第四章蛋白原核表达与纯化109

第一节重组蛋白小批量诱导表达&王雪蕾伦永志109

一、基本原理109

二、材料、试剂与主要仪器116

三、操作步骤117

四、结果分析118

五、注意事项118

第二节重组蛋白的提取&王雪蕾伦永志118

一、基本原理118

二、材料、试剂与主要仪器123

三、操作步骤124

四、结果分析124

五、注意事项124

第三节亲和层析仪纯化重组蛋白&魏玲武会娟125

一、基本原理125

二、材料、试剂与主要仪器128

三、操作步骤130

四、结果分析132

五、注意事项132

第四节 Ni2＋柱纯化重组蛋白&魏玲武会娟135

一、基本原理135

二、材料、试剂与主要仪器136

三、操作步骤137

四、结果分析142

五、注意事项143

第五章外源基因在真核细胞中的表达144

第一节细胞转染&钱嘉林李明珍144

一、基本原理144

二、材料、试剂与主要仪器148

三、操作步骤149

四、注意事项151

第二节稳定转染细胞系的建立&伦永志蒋中秀152

一、基本原理152

二、材料、试剂与主要仪器152

三、操作步骤153

四、结果分析161

五、注意事项163

第六章小干扰RNA（siRNA）的应用&蒋中秀伦永志165

第一节 siRNA的作用机制与应用165

一、siRNA的作用机制165

二、RNAi的潜能166

三、siRNA的应用167

第二节 siRNA的设计、制备和转染170

一、siRNA和RNAi作用的特点170

二、siRNA的设计171

三、siRNA的制备172

四、siRNA的转染173

第三节利用siRNA技术干扰目的基因174

一、材料、试剂与主要仪器174

二、操作步骤175

三、结果分析181

四、注意事项183

第七章计算机辅助序列设计184

第一节 PCR引物设计&马凯184

第二节 Real Time PCR引物设计&安云鹤195

第三节 siRNA的设计&安云鹤202

第八章分子生物学实验常用资料&迟庆伦永志207

第一节常用数据及换算公式、图表207

第二节常用试剂与缓冲液的配制方法216

参考文献230