图书介绍

桃CBF和ICE转录因子基因克隆与功能分析PDF|Epub|txt|kindle电子书版本网盘下载

宋艳波编著著
出版社：北京：中国农业科学技术出版社
ISBN：9787511616128
出版时间：2014
标注页数：195页
文件大小：25MB
文件页数：213页
主题词：桃－基因克隆－研究

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图书目录

第一章文献综述1

第一节植物抗逆性及研究意义1

一、逆境与植物抗逆性1

二、研究植物抗逆性的意义2

第二节低温胁迫对植物的影响及研究意义3

一、低温胁迫3

二、低温胁迫对植物生长发育的影响3

第三节植物的抗寒机理及研究进展5

一、冷驯化（cold acclimation）6

二、膜结构的稳定与抗寒性6

三、渗透调节物质9

四、植物的抗氧化保护系统9

五、细胞酶系10

六、冷诱导基因（COR）11

第四节植物抗寒基因与抗寒性改良的研究12

一、编码功能性蛋白的基因13

二、编码调控性蛋白的基因18

三、CBF和ICE转录因子基因对植物抗寒性的改良37

第五节桃的冷害和抗冷性研究38

一、桃概述38

二、低温对桃树生长发育的影响39

第六节本研究的目的和意义41

第二章桃CBF和ICE转录因子基因的克隆和序列分析43

第一节引言43

第二节试验材料、试剂和仪器45

一、试验材料45

二、试验所需的菌株、载体和感受态细胞45

三、主要化学试剂46

四、主要仪器设备46

第三节试验方法47

一、桃基因组DNA和总RNA的提取与检测47

二、PCR扩增及其产物的检测50

三、目的片段的回收与检测52

四、克隆片段的连接和转化及测序53

五、CBF基因的酵母单杂交57

第四节结果与分析60

一、桃基因组DNA和总RNA的检测结果60

二、桃CBF基因和ICE基因的克隆61

三、桃树CBF基因的生物信息学分析66

四、桃ICE基因的信息学分析72

五、酵母单杂交82

第五节小结与讨论86

一、桃的核酸提取86

二、CBF和ICE基因的克隆87

三、CBF基因的序列分析88

四、ICE基因的序列分析88

五、酵母单杂交89

第三章桃CBF和ICE基因的烟草转化90

第一节引言90

第二节试验材料与仪器92

一、试验材料92

二、主要化学试剂92

三、主要仪器设备93

第三节试验方法93

一、P3301.PpCBF和UN.ICE表达载体构建93

二、农杆菌工程菌的获得与鉴定98

三、表达载体对烟草的转化100

第四节结果与分析103

一、表达载体的构建103

二、过表达转桃CBF基因、ICE基因烟草的创制105

第五节小结108

一、外源基因转入不同物种所需载体不同，不同基因转入同一物种也存在过表达载体的选择问题108

二、转基因过程中的污染问题108

第四章转桃CBF基因烟草耐逆性分析109

第一节引言109

第二节试验材料和仪器111

一、试验材料111

二、主要化学试剂111

三、主要仪器设备112

第三节试验方法112

一、转CBF基因烟草的分子鉴定112

二、转CBF基因烟草苗期抗逆性研究113

三、转CBF基因烟草苗期与抗性相关的生理生化指标的检测114

第四节结果与分析121

一、过表达CBF转基因烟草的分子鉴定结果121

二、转CBF基因烟草阳性植株的逆境胁迫结果122

第五节小结与讨论142

一、转CBF基因烟草的分子鉴定142

二、转桃CBF基因与非转基因烟草植株在逆境胁迫下的表型变化143

三、转桃CBF基因比非转基因烟草植株矮小143

四、转桃CBF基因与对照株在逆境胁迫下的丙二醛和电导度变化144

五、转桃CBF基因与非转基因烟草植株在逆境胁迫下的SOD酶和POD酶活性变化145

六、转桃CBF基因与非转基因烟草植株在逆境胁迫下的可溶性糖和脯氨酸含量的变化147

第五章转CBF基因烟草的FAD和ERDB两基因的表达分析150

第一节引言150

第二节试验材料和仪器150

一、试验材料150

二、主要化学试剂和仪器150

第三节试验方法151

一、不同处理下烟草叶片的总RNA提取151

二、RNA的质量检测与RT-PCR151

三、FAD和ERDB两基因在逆境下的应答表达分析151

第四节结果与分析152

一、低温胁迫下转CBF基因烟草与非转基因烟草的FAD和ERDB基因的表达152

二、干旱胁迫下转CBF基因烟草与非转基因烟草的FAD和ERDB基因的表达153

三、盐胁迫下转CBF基因烟草与非转基因烟草的FAD和ERDB基因的表达154

第五节小结与讨论155

第六章研究结果与展望156

参考文献158

附录186

附录一本实验所需培养基的配方186

附录二试验中所用的引物及序列188

附录三 pCMBLA3301.CBF表达载体的构建图谱189

附录四 UN.ICE表达载体的构建图谱190

附录五转基因烟草转化过程191

附录六冷胁迫下转CBF基因植株与非转基因植株的表型变化192

附录七干旱胁迫下转CBF基因植株与非转基因植株的表型变化193

缩略词表194