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第一章 高效液相色谱用于生物样品的分离分析1

1.1 液相色谱分离生物样品的基本原理和特征1

1.1.1 生物样品的基本特性2

1.1.2 生物样品的处理方法3

1.1.3 生物样品分离对固定相的要求4

1.1.4 生物样品的检测7

1.2 生化样品分析常用的HPLC模式7

1.2.1 反相色谱法8

1.2.2 离子交换和离子色谱法9

1.2.3 离子对色谱法10

1.2.4 体积排除色谱法10

1.2.5 疏水作用色谱12

1.2.6 亲合色谱法12

1.3 氨基酸、肽和蛋白质的分离分析15

1.3.1 氨基酸分析16

1.3.2 肽和蛋白质的分离分析18

1.4 核酸及DNA分离24

1.4.1 碱基、核苷、核苷酸和核酸的分析25

1.4.2 DNA的分离分析26

1.5 糖类及其有关化合物28

1.6 生物样品的HPLC分析新技术32

1.6.1 二维液相分离32

1.6.2 快速分离技术35

参考文献37

第二章 生物样品的离子和离子交换色谱的分离分析39

2.1 离子交换色谱和离子色谱的特点及应用39

2.2 离子交换色谱40

2.2.1 离子交换色谱分离机理与影响因素40

2.2.2 色谱固定相45

2.2.3 色谱流动相48

2.2.4 分离条件选择48

2.2.5 离子交换色谱在生物样品分析中的应用51

2.3 离子色谱72

2.3.1 离子色谱分离机理72

2.3.2 离子色谱常用检测器73

2.3.3 离子色谱在生化分析中的应用74

参考文献77

第三章 液相制备色谱与模拟移动床技术82

3.1 液相制备色谱技术82

3.1.1 液相制备色谱填料83

3.1.2 液相制备色谱柱技术85

3.1.3 进样和进样分布86

3.1.4 液相制备色谱的检测和操作自动化87

3.1.5 液相制备色谱的工艺流程87

3.2 模拟移动床色谱及其在手性药物大规模拆分中的应用90

3.2.1 模拟移动床色谱的分离原理91

3.2.2 模拟移动床色谱的仪器装置93

3.2.3 操作参数的确定94

3.2.4 应用实例96

3.3 双柱切换制备系统及其在手性样品分离中的应用97

3.3.1 双柱切换制备系统的分离原理97

3.3.2 双柱切换制备系统的工艺流程99

3.3.3 应用双柱切换制备系统分离手性样品100

3.4 径向色谱在生物样品分离中的应用102

参考文献107

第四章 生物样品的超临界流体色谱分离分析110

4.1 超临界流体色谱的基本原理110

4.1.1 超临界现象和超临界流体的特征110

4.1.2 超临界流体色谱的特点112

4.1.3 流动相及改性剂114

4.1.4 色谱柱和固定相117

4.2 超临界流体色谱仪器119

4.2.1 SFC的一般流程119

4.2.2 SFC流动相输送系统120

4.2.3 SFC分离系统121

4.2.4 SFC检测系统122

4.3 SFC联用技术122

4.3.1 SFC-MS联用122

4.3.2 SFC-FTIR联用125

4.3.3 SFC-NMR联用127

4.4 超临界流体色谱的应用128

4.4.1 糖类128

4.4.2 脂肪酸和酯类129

4.4.3 甘油酯132

4.4.4 甾类化合物133

4.4.5 维生素134

4.4.6 氨基酸、肽、蛋白质136

4.4.7 药物138

4.4.8 手性对映体141

4.4.9 展望145

参考文献145

第五章 双向电泳在细胞蛋白质分离中的应用148

5.1 概述148

5.2 一向等电聚焦（IEF）电泳150

5.2.1 IEF凝胶制备151

5.2.2 样品制备与加样152

5.2.3 运行154

5.2.4 IPG胶条的平衡155

5.3 二向SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳156

5.4 胶上蛋白的检测157

5.4.1 考马斯亮蓝染色158

5.4.2 银染159

5.4.3 负染162

5.4.4 荧光染色162

5.5 存在问题163

5.6 双向电泳技术的改进163

5.6.1 三步提取法163

5.6.2 亚细胞器分离164

5.6.3 窄范围pH胶条的使用164

5.6.4 胶上差示电泳DIGE技术165

5.6.5 虚拟双向技术166

5.7 展望167

参考文献167

第六章 毛细管电泳在生物样品分析中的应用169

6.1 毛细管电泳原理与装置169

6.1.1 基本原理169

6.1.2 毛细管电泳仪器系统175

6.2 毛细管电泳在氨基酸、肽及蛋白质分析中的应用178

6.2.1 氨基酸分析178

6.2.2 肽的分析181

6.2.3 蛋白的CE分析182

6.3 DNA与核苷分析188

6.3.1 核苷酸分析188

6.3.2 寡聚核苷酸与单链DNA（ssDNA）片段分离189

6.3.3 双链DNA分离190

6.3.4 大片段DNA（＞2kbp）分离193

6.3.5 DNA测序193

6.3.6 毛细管电泳DNA片段多态性分析195

6.4 糖类样品的毛细管电泳分析198

6.4.1 糖的毛细管电泳分离198

6.4.2 糖的检测方法203

6.5 毛细管电泳手性分离208

6.5.1 毛细管电泳手性分离原理208

6.5.2 手性分离条件的选择209

6.5.3 手性毛细管电泳的应用与发展动向214

6.6 多维毛细管电泳分离218

6.6.1 矩形通道晶片平面二维电泳219

6.6.2 柱切换二维毛细管电泳分离221

6.6.3 多维立体毛细管电泳分离模式的构想224

参考文献230

第七章 毛细管电色谱及其在生物样品中的应用236

7.1 毛细管电色谱简介236

7.1.1 毛细管电色谱的历史238

7.1.2 毛细管电色谱的特点238

7.1.3 毛细管电色谱的分类239

7.1.4 展望239

7.2 毛细管电色谱仪器240

7.2.1 进样系统241

7.2.2 毛细管电色谱柱分离系统241

7.2.3 检测系统243

7.3 毛细管电色谱在氨基酸分离分析中的应用244

7.4 毛细管电色谱在肽和蛋白质分离分析中的应用248

7.5 毛细管电色谱在糖类分离分析中的应用252

参考文献255

第八章 微流控芯片在生物样品分离分析中的应用261

8.1 微流控芯片的制备261

8.1.1 照相平板印刷方法制备玻璃芯片262

8.1.2 聚合物芯片的制备方法263

8.2 毛细管电泳芯片266

8.2.1 毛细管电泳芯片的构型266

8.2.2 进样和流体控制268

8.2.3 检测系统269

8.2.4 CAE芯片271

8.2.5 毛细管电泳芯片的集成系统273

8.2.6 毛细管电泳芯片的应用275

8.3 毛细管电色谱芯片277

8.4 其他类型的微流控芯片279

8.4.1 流体控制系统的微型化279

8.4.2 样品固相萃取的微型化279

8.4.3 PCR芯片280

8.4.4 分析芯片281

8.5 结束语282

参考文献282