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第一章 LC／MS联用仪器与技术1

第一节 LC／ MS联用仪器组成部分1

第二节 大气压离子化接口2

一、大气压化学离子化2

二、电喷雾离子化4

（一）ESI原理4

（二）生物分子的ESI MS7

三、其他大气压离子化技术7

第三节 液相色谱法8

一、液相色谱仪器8

二、色谱柱8

（一）柱填料9

（二）键合固定相11

三、流动相15

（一）流动相的流速15

（二）分流与检测器性质16

（三）灵敏度及线性范围17

（四）从LC转换至LC／MS18

（五）柱后修饰18

第四节 常用质谱仪19

一、扇形磁场质谱仪19

（一）原理19

（二）性能及限制20

二、四极质谱仪和四极离子阱质谱仪22

三、飞行时间质谱法29

（一）基本原理29

（二）质量分辨率30

（三）质量测定31

四、傅里叶变换质谱法33

（一）基本原理34

（二）FTMS的结构与实验程序36

（三）性能和影响因素40

五、串联质谱法和杂交仪器43

（一）空间或时间串联质谱法44

（二）串联四极质谱法的扫描方式44

（三）碰撞活化45

（四）串联质谱法的应用46

（五）杂交质谱仪46

六、检测器47

第五节 质谱信息及解析47

一、分子量信息48

二、高分辨与准确质量测定49

三、同位素丰度50

四、不饱和度50

五、“氮规律”，奇电子离子，偶电子离子51

六、质谱解析51

（一）基本的偶电子离子裂解反应52

（二）生物分子质谱的解析53

七、信号强度及定量分析56

参考文献57

第二章 食品功能成分分析60

第一节 蛋白质与肽的LC／MS分析61

一、转基因酿酒酵母的生物活性肽测定61

（一）菌株与基因片段62

（二）发酵液制备62

（三）LC／MS分析62

（四）结果与讨论62

二、谷胱甘肽S-转移酶的LC／MS检验65

（一）原料与试剂65

（二）动物实验65

（三）仪器与条件65

（四）GST标准样品与标准曲线66

（五）结果与讨论66

三、蛋白质和肽的LC／MS快速检测法69

（一）仪器与试剂69

（二）样品制备70

（三）结果与讨论71

（四）峰驻留技术（peak packing）74

四、源于食品的抗菌肽的分析75

第二节 低聚糖的LC／MS分析80

一、麦芽三糖和蔗糖转苷产物的分析80

（一）材料与样品处理80

（二）结果与讨论81

二、阿拉伯木聚糖酶解产物的LC／MS分析83

（一）原料与样品处理83

（二）白桦木聚糖Xyl Ia, Ib酶解产物的LC／MS分析83

三、啤酒酵母中低聚甘露糖的LC／MS分析84

（一）样品预处理85

（二）甘露寡糖的LC／MS分析85

第三节 食品功能性皂苷的LC／MS检测86

一、HPLC-电喷雾负离子串联质谱分析大豆皂苷87

（一）大豆皂苷SS- Ⅲ的制备87

（二）SS- Ⅲ的HPLC-ESI MS2检测条件87

（三）SS-Ⅲ HPLC／ESI MS2分析结果87

二、人参皂苷的液质联用分析法90

（一）分离条件的确定90

（二）测定条件90

（三）以分子量对人参皂苷定性91

（四）分子量相同的人参皂苷的确定91

（五）分子量相同且二级质谱图也相同的人参皂苷的定性93

（六）实际样品的检测93

第四节 核苷类物质的LC／MS分析93

一、蘑菇柄中5'-核苷酸的LC／MS分析93

（一）材料与提取94

（二）结果分析94

二、冬虫夏草和蚕蛹虫草中的活性成分的检测95

（一）材料和方法96

（二）结果和讨论97

三、用离子对LC／MS／MS直接分析培养细胞中的AMP、 ADP和ATP100

（一）材料和方法100

（二）结果和讨论101

第五节 黄酮类化合物的LC／ MS分析105

一、黄酮类化合物的ESI-检测106

（一）黄酮的ESI-质谱解析108

（二）黄酮醇的ESI-质谱解析110

（三）黄烷酮的ESI-质谱解析112

二、苦荞黄酮的LC／MS分析114

（一）样品、试剂与仪器114

（二）样品预处理114

（三）苦荞黄酮ESI质谱解析115

三、大豆异黄酮的LC／MS分析117

（一）样品、试剂与仪器117

（二）样品预处理117

（三）大豆异黄酮ESI-质谱解析117

第六节 维生素的LC／MS分析120

一、LC／MS检测类胡萝卜素120

（一）试剂、材料与仪器121

（二）样品预处理122

（三）类胡萝卜素APCI-MS分析122

二、HPLC／MS／MS同时检测多种脂溶性维生素124

三、LC／MS同时检测多种水溶性维生素128

第七节 甾醇的LC／MS检测132

一、甾醇简介132

二、植物甾醇的LC／APCI-MS检测133

（一）材料、试剂与甾醇标样134

（二）样品处理及条件134

（三）检测结果分析134

第八节 食品中部分有害残留物的LC／MS分析140

一、食品中抗生素残留的LC／MS分析140

（一）食品中氯霉素残留的LC／MS／MS分析140

（二）食品中大环内酯类抗生素残留的LC／MS分析145

二、食品中残留激素的LC／MS分析147

（一）食品中盐酸克伦特罗残留的LC／MS分析147

（二）食品中糖皮质激素残留的LC／MS分析149

参考文献155

第三章 药品分析157

第一节 化学合成药物157

一、结构确证157

二、杂质分析161

（一）加替沙星主要杂质的分离和鉴定161

（二）加替沙星注射液光降解产物的LC／MS分析164

第二节 抗生素167

一、组分分析167

二、杂质分析——阿莫西林（amoxicillin）降解产物结构鉴定170

（一）仪器与条件170

（二）样品制备170

（三）结果与讨论170

第三节 肽和蛋白质175

一、生长抑素的分子量和氨基酸序列分析175

二、蛋白质分子量、肽图谱及序列分析178

三、糖蛋白的分析——重组人促红细胞生成素（recombinant human erythropoietin, rHuEPO）的分析185

四、蛋白质的LC／MSn分析188

五、药物或肽蛋白质的非共价结合及蛋白质组学196

（一）药物或肽蛋白质非共价相互作用196

（二）多维色谱／串联质谱联用技术分离和鉴定小鼠肝脏质膜蛋白197

第四节 中药和天然药物204

一、LC／MS／MS鉴定苏薄荷中的黄酮类成分204

（一）仪器与试剂204

（二）实验方法205

（三）结果205

（四）讨论209

二、当归补血汤成分分析210

三、天然药物成分分析2D LC／MS技术平台的初步建立216

第五节 药物代谢和药物动力学研究224

一、药物代谢和药物动力学研究的LC／MS方法学224

（一）样品制备224

（二）液相色谱225

（三）质谱仪器225

（四）内标选择225

二、血药浓度测定及动力学参数225

（一）洛伐他汀缓释片在人体内的药代动力学研究225

（二）采用自动前处理LC／MS进行血浆中药物的快速分析230

（三）中药中多成分的药物动力学研究——三七总皂苷主要成分在Beagle犬血浆中的药物动力学研究231

三、代谢物鉴定240

（一）实验240

（二）结果与讨论241

四、代谢组学研究247

（一）Sprague-Dawley大鼠尿的性别差异——生物标记物的发现和鉴别247

（二）代谢组学研究中的LC／MS技术256

参考文献259

附录261

缩略语表261

氨基酸符号表263

后记265