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第一部分 基础性实验3

第一章 水分生理3

实验1-1 植物组织中自由水和束缚水含量的测定3

Ⅰ 折射仪法3

Ⅱ 称重法4

实验1-2植物组织渗透势的测定（质壁分离法）5

实验1-3植物组织水势的测定（液体交换法）7

Ⅰ 小液流法7

Ⅱ 折射仪法8

实验1-4蒸腾强度的测定9

实验1-5环境因子对植物吐水的影响（示范）11

实验1-6植物叶子气孔密度和面积的测定12

实验1-7钾离子和ATP对气孔开度的影响13

实验1-8气孔运动与K＋迁移15

实验1-9植物伤流液中糖、氨基酸及矿物元素的点滴分析16

实验1-1蒸腾强度的测定（钴纸法）19

实验1-2小孔的扩散19

第二章 矿物营养19

实验2-1植物的元素缺乏症（溶液培养）19

Ⅰ 老叶受影响20

Ⅱ 幼叶受影响21

实验2-2 单盐毒害及离子间颉颃作用21

实验2-3 植物对离子的选择性吸收23

实验2-4 离体根对铵离子的交换吸收24

实验2-5 氧对小麦离体根吸收钾离子的影响26

实验2-6 根系体积的测定27

实验2-7 根系活力的测定28

Ⅰ α-萘胺氧化法29

Ⅱ 氯化三苯基四氮唑（TTC）法30

实验2-8 硝酸还原酶活性的测定32

Ⅰ 活体法32

Ⅱ 离体法33

实验2-9 植物灰分元素的分析鉴定34

实验2-10 植物组织可挥发性元素的鉴别36

实验2-11 植株中硝态氮的测定37

实验2-12 植株磷素的测定（钼蓝法）39

实验2-13 植株中总铁量的测定40

Ⅰ 硫氰化物法40

Ⅱ 邻二氮杂菲（菲绕啉）法41

实验2-14 微量元素铜的测定42

实验2-15 细胞内游离Ca2＋的测量（流式细胞法）44

实验2-1 磷酸盐的测定（间隔流动分析仪法）46

第三章 光合作用46

实验3-1 叶绿体色素的提取、分离及理化性质的鉴定46

实验3-2 叶绿体色素的分离和吸收光谱曲线48

实验3-3 叶绿素a、b含量测定50

实验3-4 植物光合强度的测定52

Ⅰ 改良半叶法53

Ⅱ 氧电极法54

Ⅲ 便携式光合测定仪法55

实验3-5 环境因素对光合作用的影响57

Ⅰ 叶圆片上浮法57

Ⅱ 光合测定仪实时测定法58

实验3-6 离体叶绿体光还原反应（希尔反应）59

实验3-7 叶绿体偶联因子提取及ATPase活性测定60

实验3-8 乙醇酸氧化酶活性测定62

实验3-9 二磷酸核酮糖羧化酶-加氧酶羧化活性的测定64

实验3-10 二磷酸核酮糖羧化酶-加氧酶的加氧活性的测定66

Ⅰ 氧电极法67

Ⅱ 发光光度计法67

实验3-1 藻类植物光合强度测定69

实验3-2 环境因素对光合作用的影响（量气法）69

第四章 呼吸作用69

实验4-1 植物呼吸强度的测定69

Ⅰ 简易测定法69

Ⅱ 小篮子法70

Ⅲ 呼吸比重瓶法71

实验4-2 呼吸商的测定73

实验4-3 呼吸抑制剂对呼吸作用的影响74

实验4-4 离体线粒体的氧化作用和磷酸化作用76

实验4-5 丙酮酸激酶活性的测定79

实验4-6 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶活性的测定80

实验4-7 植物组织中几种酶的组化定位鉴定81

实验4-8 多酚氧化酶活性的测定（氧电极法）85

实验4-9 过氧化氢酶活性的测定（氧电极法）86

实验4-10 过氧化物酶活性的测定88

Ⅰ 比色法88

Ⅱ化学发光法89

实验4-1 NADP磷酸酶活性测定91

第五章 物质代谢91

实验5-1 糖类含量的测定91

Ⅰ 可溶性总糖的测定91

Ⅱ 还原糖的测定93

Ⅲ 蔗糖、葡萄糖和果糖的测定95

Ⅳ 淀粉的测定99

Ⅴ 粗纤维含量的测定99

实验5-2 糖类代谢酶的测定100

Ⅰ α-淀粉酶与β-淀粉酶活力的测定100

Ⅱ 蔗糖合成酶和蔗糖磷酸合成酶活性的测定103

实验5-3 油脂过氧化值的测定104

实验5-4 脂肪水解酶活性的测定105

实验5-5 蛋白质的提取和测定107

Ⅰ 蛋白质的提取107

Ⅱ 微量凯氏定氮法109

Ⅲ Folin-酚试剂法111

Ⅳ BCA测定蛋白质112

Ⅴ 考马斯蓝染料结合法114

Ⅵ 紫外吸收法115

实验5-6 转氨酶（GOT、GPT）的提取和测定116

实验5-7 酰脲含量的测定118

实验5-8 次生物质含量的测定120

Ⅰ 总黄酮含量的测定120

Ⅱ HPLC法测定黄酮苷元含量121

Ⅲ 茶多酚含量的测定123

Ⅳ 花青素含量测定124

Ⅴ 咖啡碱的提取125

Ⅵ 咖啡碱含量测定（质量法）127

Ⅶ 总皂苷的粗提及HPLC法测定其中甾体皂苷元含量128

Ⅷ 挥发油含量及成分分析131

实验5-1 化学发光法测量脂质过氧化及抗氧化剂135

实验5-2 化学发光法测定葡萄含量135

实验5-3 蛋白质特性分析135

实验5-4 穿心莲总内酯的含量测定135

第六章 植物激素135

实验6-1 吲哚乙酸（IAA）的提取、纯化和测定135

实验6-2 生长素含量测定（小麦芽鞘切段伸长法）137

实验6-3 吲哚乙酸氧化酶活性的测定139

实验6-4 赤霉酸（GA3）的生物鉴定（水稻幼苗第二叶叶鞘伸长的“点滴法”）140

实验6-5 GA3对小麦种子α-淀粉酶的诱导形成142

实验6-6 酶联免疫法测定脱落酸（ABA）含量144

实验6-7 细胞分裂素含量测定（萝卜子叶测定法）146

实验6-8 细胞分裂素对花色素苷积累的影响147

实验6-9 生长调节剂对黄瓜性别表达的作用148

实验6-10 生长调节剂对果实发育的影响149

实验6-11 香石竹的切花保鲜151

实验6-12 水仙的矮化152

第七章 生长发育154

实验7-1 种子生活力的快速测定154

Ⅰ 氯化三苯四氮唑法（TTC法）154

Ⅱ 溴麝香草酚蓝法（BTB法）155

Ⅲ 纸上荧光法155

实验7-2 种子活力的测定157

Ⅰ 抗冷法157

Ⅱ 砂压法158

Ⅲ 低温法158

Ⅳ 电导法159

Ⅴ 加速衰老法160

实验7-3 人工种子的制备方法161

实验7-4 细胞生长周期测定（流式细胞法）162

实验7-5 花粉活力的测定165

Ⅰ 碘-碘化钾染色测定法165

Ⅱ 过氧化物酶测定法165

Ⅲ 氯化三苯四氮唑法（TTC法）166

实验7-6 花粉管生长的测定167

实验7-7 谷物种子萌发时淀粉酶的形成（示范）170

实验7-8 油类种子萌发时脂肪酸含量的变化171

实验7-9 大豆萌发时氨基酸含量的变化172

实验7-10 光对植物叶绿体运动的调控作用173

实验7-11 H＋流向与植物生长模式175

实验7-12 植物开花的光周期诱导176

Ⅰ 苍耳的光周期诱导176

Ⅱ 日本青萍6746的光周期诱导178

实验7-13 球根花卉的花期调节180

实验7-14 胚珠的离体受精181

实验7-15 植物的组织培养183

Ⅰ 愈伤组织的培养和分化183

Ⅱ 原生质体的分离和培养185

Ⅲ 离体培养下的花芽分化186

实验7-16 拟南芥的水培和生长发育观察187

实验7-1 谷物种子萌发时淀粉酶活性的测定190

第八章 植物与环境190

实验8-1 植物的向性运动（示范）190

实验8-2 高温和低温对植物的伤害191

实验8-3 渗透胁迫与脯氨酸的积累192

实验8-4 高效液相色谱法测定海藻糖194

实验8-5 冷胁迫对质膜H＋-ATPase活性的影响195

实验8-6 干旱处理对叶片脂氧合酶活性的影响197

Ⅰ 分光光度法197

Ⅱ 氧电极法198

实验8-7 盐胁迫蛋白的检测199

实验8-8 超氧化物歧化酶活性的测定202

Ⅰ 比色法202

Ⅱ 邻苯三酚自氧化法203

实验8-9 植物组织中活性氧含量的测定与定位分析205

Ⅰ H2O2的组织原位定位分析（DAB染色法）205

Ⅱ 过氧化氢含量的测定206

Ⅲ 氧自由基产生速率的测定（羟胺法）208

实验8-10 植物膜脂脂肪酸的分析209

实验8-11 丙二醛的测定211

实验8-12 苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性的测定214

实验8-13 植物根系分泌物215

Ⅰ 植物根系分泌物的观察215

Ⅱ 植物根系分泌的酶216

实验8-14 土壤中的酶217

实验8-15 植物组织细胞死亡的分析鉴定219

Ⅰ 台盼蓝染色法219

Ⅱ FDA荧光染色法220

实验8-1 花粉管生长的趋性222

实验8-2 植物幼苗的超微弱发光222

实验8-3 β-1，3-葡聚糖酶活性的测定222

实验8-4 几丁酶活性的测定222

实验8-5 微微型浮游植物的识别和细胞亚群丰度测定（流式细胞法）实验8-6 浮游植物丰度测定（流式细胞法）实验8-7 氧自由基吸收能力（ORAC）的测定第九章 植物分子生物学222

实验9-1 根癌农杆菌介导的拟南芥稳定转化222

实验9-2 根癌农杆菌介导的烟草叶片瞬时转化223

实验9-3 植物基因组DNA的制备225

Ⅰ 尿素法制备植物基因组DNA225

Ⅱ CTAB法制备植物基因组DNA226

实验9-4 叶绿体DNA的制备228

实验9-5 植物总RNA的提取229

Ⅰ LiCl法提取植物总RNA229

Ⅱ 异硫氰酸胍法提取植物总RNA230

实验9-6 电泳法鉴定植物基因组DNA和总RNA232

实验9-7 分光光度计法分析植物基因组DNA和RNA234

实验9-8 PCR鉴定植物肌动蛋白基因235

实验9-9 拟南芥抗逆特异基因Rd29A表达水平的半定量和定量分析236

实验9-10 用GUS与启动子融合表达法检测基因表达239

实验9-1 非洲菊（Gerberahybida）花瓣CHS基因的表达检测241

实验9-2 原位杂交241

实验9-3 TAIL-PCR分析T-DNA的插入旁邻序列241

第十章 果蔬采后生理241

实验10-1 果实硬度的测定241

实验10-2 果蔬可溶性固形物的测定242

实验10-3 果蔬含酸量的测定244

实验10-4 果蔬维生素C含量的测定246

实验10-5 果蔬乙烯释放量的测定（气相色谱法）247

实验10-6 果蔬ACC含量的测定250

实验10-7 气相色谱法测定果蔬中的乙醇含量251

实验10-8 果蔬二氧化碳释放速率的测定（气相色谱法）253

第二部分 综合性实验257

实验1 植物在渗透胁迫条件下形态、生理和基因表达方面的适应性变化257

实验2 热激诱导的玉米幼苗耐热性观察及其可能的生理生化机制259

实验3 钙信使系统和活性氧对ABA诱导气孔关闭的影响261

实验4 槐米中芸香苷的提取、纯化与鉴定263

实验5 植物生长调节剂对植物插条不定根发生的影响265

实验6 盐胁迫对小麦种子萌发过程的生理影响267

实验7 盐胁迫对蚕豆种子萌发后第一对真叶的生理影响269

实验8 蛋白质印迹检测特异性蛋白质271

实验9 免疫共沉淀检测植物体内蛋白质互作276

附录280

附录1 常用酸碱的浓度280

附录2 常用缓冲溶液的配制280

附录3 几种常用缓冲剂的pKa287

附录4 常用酸碱指示剂287

附录5 泛用酸碱指示剂288

附录6 离心机转速与相对离心力的换算288

附录7 提高溶液饱和度时应加入硫酸铵质量的对应关系289

附录8 不同温度下以空气饱和的水中的氧含量290

附录9 常用植物激素的一些化学特性290

附录10 植物组织和细胞培养常用培养基成分291

附录11 常用培养基附加成分292